山羊の人工授精チャレンジ　MMNS第1クール③　ついに・・・

前回の記事はこちら。山羊の人工授精チャレンジ　MMNS第1クール②（発情同期化を使った人工授精プログラム）

今回は11月3日までのMMNS第１クールのまとめです。

＊山羊Aちゃん
2回の発情同期化（MMNS）と人工受精をするものの残念ながら妊娠していません。
今日から3回目のMMNSをはじめました。
もしこれで妊娠しなかったら、次の方法を検討しようと思っています。

＊山羊Cちゃん
1回の発情同期化（MMNS）と人工受精を実施。
今日から2回目のMMNSをはじめました。

＊山羊Bちゃん
1回目の発情同期化（MMNS）と人工授精を実施。
その後、30日の妊娠鑑定（－）後に発情が見られたので、
発情同期化はしないでそのまま人工授精を実施しました。

そしてついに！！
11月3日の40日の妊娠鑑定で、妊娠を確認しました。

人工授精チャレンジ、初妊娠！！

超音波での画像を見たとき、とてもとてもうれしかったです。

Cちゃんの分娩予定日は山羊さんの妊娠期間は5ヶ月なので、2020年の2月25日です。
このように、分娩予定日がわかるとお産の心構えができ観察ができるので、
分娩事故を減らすことに繋がります。

残念ながら、発情同期化での妊娠ではなく自然の発情での妊娠でしたが
何はともあれ、現場での凍結精液での妊娠は一歩前進。

そして、発情同期化のMMNSは、現在経過を見ながら
海外文献を調べてお薬の量を再検討したり、
他の発情同期の論文を取り寄せて新たな方法も検討しています。

全部の山羊さんが妊娠して卒業できますように。

山羊の人工授精チャレンジ　MMNS第1クール ②

今日は山羊Aちゃんの人工授精後30日の妊娠鑑定のご報告と
山羊CちゃんのMMNSスタートのお話しです。

前回の記事: 山羊の人工授精チャレンジ　MMNS第1クール（発情同期化を使った人工授精プログラム）

まず、山羊Aちゃんの30日の妊娠鑑定は・・・

残念・・・赤ちゃんを確認することができませんでした。
この後、人工授精後40日にもう一度確認して、妊娠していなかった場合には
もう一度発情同期化MMNSに入ります。

凍結精液での人工授精の受胎率は20～30％と低めです。
そのため、何度か諦めず繰り返し、チャレンジしていきたいと思います。

そして、山羊CちゃんがMMNS第1クールをスタートしました。

発情同期化MMNSの最終日のお注射と発情確認をしました。

雄山羊に近づけると、寄り添ってしっぽを振る発情行動が見られたので、
人工授精を行いました。（1回目）

また、次の日、山羊Cちゃんを観察してみると、
前日よりはっきりした発情が見られました。
柵越しに雄山羊から離れない様子が見られました。

再び人工授精を行いました。（2回目）

そして、再度夕方、人工授精を行いました。（3回目）

…..

ヤギの発情適期について。発情行動と人工授精のタイミング

ここで、山羊さんの発情適期について復習しましょう。

＊雌の発情持続時間は
40時間

＊排卵時期は発情末期
30～40時間ごろ

＊卵子の受精能の保有時間
排卵後　8時間

＊雌の生殖器内での精子の受精能保有時間
40～50時間

以上のことから、
発情適期は、発情開始20～40時間になります。

そして、ぴったり発情を合わせることは難しいので、
1発情中に10～12時間間隔で2回受精するほうが受胎の確立があがります。

発情行動と人工授精のタイミングをまとめると・・・

夕方に発情がみられた→次の日の朝、1回目の受精。夕方2回目。
朝から発情がみられた→その日の夕方に1回目の受精。次の日の朝に2回目。
昼から発情がみられた→その日の夜に1回目の受精。次の日の昼に2回目。

…..

しかし、実際の現場では、正確にいつから発情が始まったかみることは難しいと思います。
そのため、発情同期化と発情確認をうまく組み合わせて、データを集めながら、
定時人工授精ができないか研究していきたいと思っています。

今回の山羊Cちゃんの場合は、
1回目の人工授精は早かった可能性があります。
発情行動からいうと、2回目と3回目が適期であったかもしれません。

今は、まずは受胎させるのが一番なので
できることを一つずつ積み上げていこうと思います。

続き: 山羊の人工授精チャレンジ　MMNS第1クール③（発情同期化を使った人工授精プログラム）　ついに・・・・

山羊の人工授精チャレンジ　MMNS第1クール

しばらく時間が空いてしまった、山羊の人工授精チャレンジ。

あきらめていませんよー！！

（前回までのヤギ人工授精チャレンジ記事はこちらから。）
山羊の人工授精チャレンジ　しろちゃん自然周期人工授精①

この間、前回の自然周期の人工授精がうまくいかなかった原因などを一つずつ
解決していました。

そして、あらたに
発情同期化を使った人工授精の研究をはじめました。

院長発案のこのプログラムは「MMNS」と名付けて、先月からスタートしています。

今回の研究に参加してくれる山羊さんは6頭です。

初日は妊娠鑑定をして妊娠していないかを確認しました。
6頭の山羊さんは雄山羊と一緒だった為、すでに妊娠している可能性があったからです。

妊娠鑑定の結果

3頭は妊娠鑑定（＋）
1頭は確定できなかったので再鑑定
2頭は妊娠鑑定（－）

妊娠鑑定（－）だった2頭の山羊さん（山羊Aちゃん・山羊Bちゃん）はこの日から
MMNSプログラムの注射をスタートしました。

山羊Aちゃんは順調に第1クールで人工授精をしました。
山羊Bちゃんは再発情が見られたので、再度、MMNSの注射を行い人工授精をしました。

人工授精の際には、凍結精液の精子の状態を確認しました

人工授精の様子

現在、山羊Aちゃんと山羊Bちゃんは妊娠鑑定待ちです。

再鑑定の山羊Cちゃんは妊娠（－）だったため、
これからMMNSの同期化の注射からはじめます。

次回、良い報告ができますように！！

続き: 山羊の人工授精チャレンジ　MMNS第1クール②

山羊の人工授精チャレンジ　現場での妊娠鑑定

牛の直腸検査に使用するエコーで山羊の妊娠鑑定を試みていましたが…

今まで、私たちは現場で、
牛の直腸検査に使用するエコーで妊娠鑑定を試みていました。

（妊娠鑑定の方法について、詳しくはこちらの記事をどうぞ。）
山羊の人工授精チャレンジ　妊娠鑑定方法

エコーのプローブを乳房の付け根にあてて、羊水に浮かぶ赤ちゃん山羊を探す方法です。
赤ちゃんの心臓が動くのを確認できたら、妊娠と診断していました。

胎児を探すこと、とくに心臓の動きを確認することが難しい

長野の家畜改良センターで勉強させていただいたときは、この方法で妊娠鑑定が容易にできました。
しかし、私たちが使用しているエコーではなかなか乳房横のアプローチでは、
胎児を探すこと、特に心臓の動きを確認することが難しい状況でした。
おそらくプローブが小さいことやエコーの機械の精度などがが関係していると思われます。

確実に妊娠しているか、していないかがわからないと妊娠鑑定をする意味がなくなってしまいます。
超音波診断法の中でも経膣プローブを用いて膣の中に挿入する方法は、高い精度で妊娠を診断することができますが、
経膣プローブはとても高価なので、購入しなくてもできる方法をまずは検討してみました。

経膣プローブを購入せずにできる妊娠鑑定の方法「超音波ドップラー法」を試してみたものの…？

現場での妊娠鑑定の精度を上げるために、
はじめに試して見たのは・・・

「超音波ドップラー法」です。
この方法はお腹の中の赤ちゃんの心音または血流音を確認して妊娠を判定します。。
人工授精後、60日以降で診断が可能です。
人間の赤ちゃんの心音を自宅で聞ける、ドップラーを購入しました。

ひとまず、自分の胸にあてて心音を聞いてみると・・・

どきどきどきどき・・・・

はっきり聞こえる！！
これは期待できるかもとわくわくしながら、
さっそく確実に妊娠している山羊さんにドップラーをあてて見ました。

しかし・・・残念ながら全然聞こえず・・・。

現場での妊娠鑑定の決定版「ヤギの直腸にプローブを入れる方法（改）」

そこで、院長発案、牛の妊娠鑑定と同じように直腸にプローブを入れる方法を
試してみることになりました。

この方法の問題点は、

・山羊さんは牛のようにおしりから手が入らない。

・プローブだけでは中に入っていかないということです。

この問題を解決するために、プローブにアタッチメントをつけました。

痛くないように、ゼリーをつけておしりから優しく挿入すると・・・
羊水に浮かぶ胎児が確認でき、心臓の動きも見ることができました。

現場での妊娠鑑定の決定版！！

この方法なら、精度が高く、
山羊さんのオーナーさん達からの妊娠鑑定の依頼を受けることができるようになりました。

妊娠鑑定を行うことの2つのメリット

妊娠鑑定をすることにはメリットがあります。

妊娠していないヤギを発見し、妊娠へ導くことで生産性をあげる

１つ目は
妊娠していない山羊さんを見つけることができ、再度種付けや雄山羊さんと一緒にすることで
妊娠に導くことができるということです。

畜産として、山羊さんを飼養している人たちには、子山羊が生まれないというのは死活問題になります。
妊娠鑑定によって、長い間、妊娠していない山羊さんがそのままでいることがなくなる、
すなわち生産性をあげることができるのです。

分娩時期を知ることで、母ヤギの栄養状態を整え分娩事故を防止できる

2つ目は
いつ妊娠したかわからない場合、エコーで胎児の体長を測ることで、おおよそのの月齢がわかります。
まだまだ、人工授精が山羊さんで行われていることが少なく、
雄山羊さんと一緒にして、妊娠するのを待っている方が多いです。
そのため、いつ種がついたかわからない、ということは分娩がいつなのかわからないのです。
分娩時期がわかれば、分娩前に母山羊さんの栄養状態を整えたり、分娩事故の予防にもなります。

参考までに…

ザーネン種の妊娠日齢と体長の関係は以下の通りです。

妊娠日齢
12日　　　0.2cm
18日　　　0.6cm
25日　　　1.0cm
35日　　　2.0cm
42日　　　3.0cm　＊超音波での妊娠鑑定の時期
56日　　　5.0cm
63日　　　9.0cm
84日　　 16.0cm ＊ここから急速に成長
140日　　50.0cm
150日　　出産

今後、直腸からの妊娠鑑定の精度を高める工夫や私の住む島の山羊さん達のデーターを妊娠鑑定時に集めていきたいと思っています。

実際に妊娠鑑定の依頼を受けた際の記事はこちらです。
山羊の診療Diary　症例18　妊娠鑑定

山羊の精液についての調査

私の目標は凍結精液での現場でできる人工授精です。
しかし、まずは受胎率の高い液状精液での人工授精も考えはじめたので、
山羊の精液について調べてみました。
（液状精液での受胎率60～70％、凍結液精液での受胎率20～30％）

まずはじめに精液が正常かどうか検査をする

液状精液は、雄山羊から精液採取した後、はじめに精液が正常か検査をします。
そして液状保存用希釈液で薄めて、2時間程度かけて4～5℃に温度を下げます。
その後、遮光して冷蔵庫で保存して、人工授精に利用します。

日数経過による状態変化

1週間保存は可能ですが、3日間以内に使用すると良好な受胎率が期待できるとのことです。
実際、私は長野支場に研修に行ったときに、2頭の雄の精液を、
3日目と5日目に顕微鏡で見せてもらいました。
3日目は2つとも精子の活力が良好でしたが、
5日目は1つは良好、もう一つは活力がかなり落ちていて、
人工授精では使用できない状態でした。

精液検査の方法

精液の検査は…

＊肉眼的検査

・精液量　1ml　（0.5～1.5ml）
・色　　　白色～クリーム色
・におい　無臭
・PH　　　6.8（6.4～7.1）
・雲霧状態　＋＋＋
・粘稠度　濃厚で粘稠
・活力概観　渦流
・比重　1.032～1.047　（平均　1.039）

＊顕微鏡検査

・活力、生存率　90＋＋＋，90%以上
・精子数　20億/ml（11～40億/ml）
・奇形率　10%以内

＊不良精液

・無精子のもの
・血液（精液がピンク）や尿、膿の混入
・精子の生存率、活力が極端に悪いもの
（新鮮精液で生存率が50%以下のもの。活力＋＋以上のものが50%以下のもの）
・奇形率が極端に高いもの（山羊の平均奇形率は22%）
・PHが著しく酸性またはアルカリ性のもの

そして、
山羊さんはは家畜の中で精液量が最も少なく（平均1ml）
逆に最も精子濃度が濃く、精液量の約1/3を精子が占めています。

山羊の人工授精チャレンジ　しろちゃん自然周期人工授精③

前回のしろちゃん人工授精チャレンジの結果報告です。
前回の記事: 山羊の人工授精チャレンジ　しろちゃん自然周期人工授精②

3月4日に人工授精をしてから40日目の妊娠鑑定を行いました。

妊娠していますように！！とエコー開始。

エコー検査など、妊娠鑑定方法などはこちらの記事をどうぞ。
山羊の人工授精チャレンジ　妊娠鑑定方法

結果は・・・

羊水に浮かぶ赤ちゃんをエコーで確認できず・・・
残念ながら、今回も妊娠していませんでした。

わたしはがっくり…自然周期で妊娠を確認したかったな。

でも！！落ち込んでいても、何もはじまらないので、

急遽、その場で院長先生とゆうきさんと作戦会議。

そして、基本を一つずつ見直していくことになりました。

人工授精の基本を見直し

・凍結精液の性状を確認する

→凍結精液の精子の活性を確認する。

精液の性状について、詳しくはこちら。
山羊の人工授精チャレンジ　～精液の性状～

・人工授精をする山羊の数を増やす

→もしかしたら、しろちゃんが妊娠しにくい山羊さんの可能性がある。
出産後60日経過して、人工授精にチャレンジが出来る山羊さんたちがいるので
しろちゃんと一緒に発情の誘起、同期化して数を増やしてチャレンジする。

・液状精液を作成してみる

液状精液は1発情あたり60～70%の受胎率があり、凍結精液は20～30%と低い。
そのため、受胎率の高い液状精液の人工授精から試してみる。

・ホルモン剤による発情の誘起・同期化を行う

わたしの住む地域の山羊は雑種が多く、緯度が低いためはっきりとした繁殖シーズンを持たない
山羊さんもいる。しかし、出産は1月～3月が多いのでザーネン種と一緒で、
9月～11月が繁殖シーズンとしている山羊さんが多い。
そのため、非繁殖シーズンである今、ホルモン剤による発情の誘起が必要になる。

まだまだはじまったばかり。
やれることはたくさんあるので、心折れずにがんばろう！！